【摘要】 目的 通过对工艺的分析研究，找出造成冯了性风湿跌打药酒菌检不合格的原因，采取有效措施进行改进。方法 以《中国药典》2005版的微生物限度检查法，运用统计的分析方法找出主因。结果 生产中使用的包装材料是影响菌检不合格的主要因素。结论 通过有效方法控制包装材料的质量，冯了性风湿跌打药酒的一次菌检合格率得到明显提高。 【关键词】 冯了性风湿跌打药酒；微生物限度检查；细菌；真菌；控制菌 冯了性风湿跌打药酒由丁公藤、麻黄、桂枝、陈皮等27味中药材组成，具有祛风除湿、活血止痛的功效，临床用于治疗风寒湿痹、手足麻木、腰腿酸痛、跌打损伤、瘀滞肿痛等证。冯了性风湿跌打药酒是我公司的主要产品，为了控制产品质量，同时提高该产品的一次菌检合格率，本文对该产品的微生物限度检查法进行方法验证，并对生产状况进行调查，找出造成冯了性风湿跌打药酒菌检不合格的原因，制定相应对策进行改进，最后检查效果。 1 微生物限度检查的方法验证［1］ 1.1 菌种 1.1.1 菌种的来源金黄色葡萄球菌［CMCC（B）26 003］、铜绿假单胞菌［CMCC（B）10 104］、枯草芽孢杆菌［CMCC（B）63 501］、生孢梭菌［CMCC（B）64 941］、白色念珠菌［CMCC（F）98 001］、黑曲霉［CMCC（F）98 003］均由中国药品生物制品检定所提供。 1.1.2 菌液的制备将大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物接种于营养肉汤培养基中，培养18～24 h，用0.9％无菌氯化钠溶液制成每1 mL含菌数为50～100 cfu（细菌、真菌验证）或10～100 cfu（控制菌验证）的菌悬液。将白色念珠菌的新鲜培养物接种于改良马丁培养基中，培养24～48 h，用0.9％无菌氯化钠溶液制成每1 mL含菌数为50～100 cfu的菌悬液。将黑曲霉的新鲜培养物接种于改良马丁琼脂斜面培养基，培养5～7 d，加入 0.9％无菌氯化钠溶液3～5 mL，洗脱孢子，然后吸出孢子悬液至无菌试管内，用0.9％无菌氯化钠溶液制成每1 mL含孢子数50～100 cfu的孢子悬液。 1.2 培养基营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、胆盐乳糖培养基、4?甲基伞形酮葡糖苷酸培养基、胆盐乳糖发酵培养基、乳糖发酵培养基、营养肉汤培养基、曙红亚甲蓝琼脂培养基、甘露醇氯化钠琼脂培养基、溴代十六烷基三甲胺培养基均由中国药品生物制品检定所提供。 1.3 供试液的制备取冯了性药酒10 mL，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100 mL，混匀，作为1∶10的供试液。 1.4 细菌、真菌和酵母菌的验证 试验组:取供试液1 mL和50～100 cfu试验菌液，分别注入平皿中，立即倾注培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，按平皿法测定其菌数。 供试品对照组:取1 mL供试液，按常规菌落计数方法测定供试品的本底菌数。 菌液组:直接将同上试验菌的菌液量注入平皿中，立即倾注培养基，平行制备2个平皿，测定所加试验菌的菌数。 3个批次样品的验证结果见表1。从表1可见，试验组的菌回收率均大于70％，可采用常规法进行冯了性药酒的细菌、真菌及酵菌测定。 表1 细菌、真菌和酵母菌验证结果(n=3)（略） Tab.1 Test of bacteria and fungi 1.5 大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的验证［2］ 试验组：吸取10 mL供试液及10～100 cfu试验菌，加入100 mL胆盐乳增菌培养基或营养肉汤培养基，按该控制菌的检查法进行检查。 表2 控制菌的验证结果（略） Tab.2 Controlled bacterial growth 2 原因调查 2.1 一次菌检不合格的情况分析 对2005年1～7月共150批冯了性风湿跌打药酒的菌检情况进行了调查分析，结果：全部批次的样品细菌数均不超标；30批样品真菌数超标，占20?0%；1批样品细菌、真菌超标，占0.7%。从以上结果可看出，菌检不合格品的主要缺陷项目是真菌数超标，确定主要的监控方向是真菌。 2.2 对工艺流程进行监控［3］ 通过以上分析，并对整个工艺流程进行研究，确定了下面5处的监控点（见图1），对11批产品进行跟踪监测，结果见表3。从表3可见，瓶盖菌落数超标与成品的真菌不合格有相关性。 图1 冯了性风湿跌打药酒的生产流程图（略） Fig.1 Flowchart of Fengliaoxing Fengshi Dieda medicinal wines 表3 冯了性风湿跌打药酒从浸渍——成品的真菌监测情况（略） Tab.3 Detection of fungi in the wine 注：*为超出企业内控标准 3 改进措施 3.1 对药酒瓶、瓶盖的生产厂家实行严格的审核制度，厂家要具有“药包材注册证”，严格按药包材注册办法的要求进行生产：①生产厂家应建立生产和质量管理机构，从事生产的各级人员应进行培训、考核；②生产厂房按工艺流程及洁净级别进行合理布局，有相应规模的生产区及储存区；③设备符合生产要求，便于生产、维修及保养，能防止差错和减少污染；④制定物料的严格管理制度；⑤生产厂家应有防止污染的卫生措施，制定各项卫生管理制度，由专人负责，切实执行；⑥制定各项操作规程，并严格执行，生产过程有完整的批生产记录；⑦产品有完善的销售与收回记录。 3.2 严格按要求对瓶盖的外观、尺寸及微生物等项目进行检查，检验合格后才可放行使用。 3.3 对药酒瓶、瓶盖制定合理的存贮期，到期应进行复验，复验合格后才可使用；如因存贮期过长造成微生物限度超标，应进行灭菌处理，复检合格才能使用。 4 效果评价 经过改进之后，2005年底对9月至10月共22批的冯了性风湿跌打药酒及其瓶盖的菌检情况进行调查，结果：瓶盖的菌落数控制在少于100个/10盖；成品冯了性药酒的细菌、真菌的菌落数亦控制在少于100个/ mL左右；控制菌亦未检出，均符合法定标准要求。由结果可知冯了性风湿跌打药酒一次菌检合格率已得到明显的改善。 5 结论 经过对冯了性风湿跌打药酒微生物检查异常的调查研究，找出造成该产品菌检不合格的原因，采取有效措施进行改进后，一次菌检合格率得到了显著的提高。总结到：在加强生产工序的质量管理之外，包装材料的质量管理亦不容忽视,要严把包材生产厂家的质量关，要求厂家要有完善的质量保证体系，才能保证生产出合格的包材产品；我公司对包材要有严格的验收标准，进一步保证只有合格的产品才能进入包装生产流程，杜绝因包材造成的成品不合格现象。 &nb |